Ocena zmian profilu ekspresji genów kandydujących w podkładkach jabłoni o odmiennym stopniu tolerancji mrozowej

Sylwia Keller-Przybyłkowicz

sylwia.keller@inhort.pl
Zakład Hodowli Roślin Ogrodniczych, Instytut Ogrodnictwa, ul. Konstytucji 3 Maja 1/3, 96‒100 Skierniewice (Poland)
http://orcid.org/0000-0002-3473-9706

Mariusz Lewandowski


Zakład Hodowli Roślin Ogrodniczych, Instytut Ogrodnictwa, ul. Konstytucji 3 Maja 1/3, 96‒100 Skierniewice (Poland)
http://orcid.org/0000-0002-4852-5514

Abstrakt

Celem przeprowadzonych badań była identyfikacja genów sprzężonych z cechą mrozoodporności podkładek jabłoni. Ocenę zmian w poziomie ekspresji wyizolowanych genów przeprowadzono metodami RNAseq i qRT-PCR, dla podkładek zróżnicowanych po względem stopnia tolerancji mrozowej: P 66 (tolerancyjna) i M.9 (wrażliwa).
W wyniku przeprowadzonych odczytów sekwencji RNA (sekwencjonowanie de novo w systemie Illumina Solid) dla w/w podkładek zidentyfikowano około 167 milionów odczytów unikatowych sekwencji, z których do wstępnych badań weryfikacyjnych wytypowano 15 o zróżnicowanym profilu ekspresji. Sekwencje poddano adnotacji funkcjonalnej. Wytypowane geny kodują: białka strukturalne i integralne błon komórkowych i wakuoli komórkowych, czynników transkrypcyjnych, białek regulujących transport międzykomórkowy i wewnątrzkomórkowy, białek hydrolizujących wiązania C-O i C-N oraz białek wiążących makro- i mikroelementy. Celem weryfikacji typu regulacji sekwencji transkryptomu uzyskanych z sekwencjonowania nowej generacji (NGS), dla tych samych prób przeprowadzono ilościową analizę transkryptu genów (qRT-PCR). Spośród badanych genów, trzy reprezentowały identyczny typ regulacji w badanych układach eksperymentalnych RNA-seq i qRT-PCR. Wytypowane geny stanowią potencjalne sekwencje kandydujące do sporządzenia markerów funkcjonalnych, umożliwiających wczesną selekcję podkładek jabłoni tolerancyjnych na mróz.

Instytucje finansujące

Badania finansowano ze środków projektu MRiRW: Badania podstawowe na rzecz postępu biologicznego w produkcji roślinnej, decyzja HOR.hn.802.4.2019 z dnia 14.05.2019 r. Zadanie nr 73.

Słowa kluczowe:

adnotacja funkcjonalna genów, Malus domestica Borkh., sekwencjonowanie, profil ekspresji, ilościowa reakcja amplifikacji

Artlip, T. S., Callahan, A.M., Bassett, C.L., Wisniewski, M.E. (1997). Seasonal expression of a dehydrin in sibling deciduous and evergree genotypes of peach (Prunus persica [L.] Batsch). Plant Molecular Biology, 33: 61‒70.
Google Scholar

Aygun, A. (2005). The late spring frost hardiness of some apple varieties at various stage of flower buds. Tarim Bilimeri Degrisi, 11 (3): 283‒285.
Google Scholar

Bai Y, Dougherty, L., Xu, K. (2014). Towards an improved apple reference transcriptome using RNA-seq. Mol. Genet Genomics, 289: 427‒438.
Google Scholar

Callesen, O. (1996). Testing 20 apple rootstocks. VI Inter.Symposium on Integrated Canopy, Rootstock, Environmental Physiol.in Orchard Systems. Acta Hort., 451: 137‒146.
Google Scholar

Chinnusamy, V., Zhu, J., Zhu, J. K. (2006). Gene regulation during cold acclimation in plants. Physiol. Plant., 126: 52‒61. DOI: 10.1111/j.1399‒3054.2006.00596.
Google Scholar

Du, X., Xiao, Q., Zhao, R., Wu, F., Xu, Q., Chong, K., Meng, Z. (2008). TrMADS3, a New Mad-box gene, from a perennial species Taihangiarupestris is upregulated by cold and experiences seasonal fluctuation in expression level. Dev. Genes Evol., 218: 281‒292.
Google Scholar

Edwards, D., Batley, J. (2010). Plant genome sequencing: applications for crop improvement. Plant Biotechnology Journal, 8 (10): 2‒9.
Google Scholar

Feng M-X., Zhao, Q., Zhao L-L., Qiao, Y., Xie X-B., Li H-F., Yao Y-X., You C-X., Hao Y-J. (2012). The cold-induced basis helix-loop-helix transcrition factor gene MdCIbHLH1 encodes ans ICE-like protein in apple. Plant Biology, 12: 22.
Google Scholar

Gilmour, S. J., Zarka, D.G., Stockinger, E. J., Salazar, M. P., Houghton J. M., Thomashow, M. F. (1998). Low temperature regulation of the Arabidopsis CBF family of AP2 transcriptional activators as an early step in cold induced COR gene expression. The Plant Journal, 16: 433‒442. DOI: 10.1046/j.1365‒313x.1998.00310.
Google Scholar

Girardi, C. L., Rombaldi, C. V., Cero, J. D., Nobile, P. M., Laurens, F., Bouzayen, M., Quecini, V. (2013). Genome-wide analysis of the AP2/ERF superfamily in apple and transcriptional evidence of ERF involvement in scab pathogenesis. Scientia Horticulturae, 151: 112‒121.
Google Scholar

Everaert C, Luypaert M, Maag, J. L. V., Cheng, Quek Xiu, Marcel, E. (2017). Benchmarking of RNA-sequencing analysis workflows using wholetranscriptomeRT-qPCR expression. Nature: 7. 1559. DOI: 10.1038/s41598‒017‒01617‒3
Google Scholar

Imelfort, M., Edwards, D. (2009). De novo sequencing of plant genomes using second-generation technologies. Briefings in Bioinformatics, 10 (6): 609‒618.
Google Scholar

Kalberer, S., Wisniewski, M., Arora, R. (2006). Deaclimation and reaclimation of cold-hardy plants: Current understanding and emerging concepts. Plant Scince, 171: 3‒16.
Google Scholar

Kumar, S., Blaxter, M. L. (2010). Comparing de novo assemblers for 454 transcriptome data. BMC Genomics, 11: 571.
Google Scholar

Luby, J. J. (1991). Breeding cold-hardy fruit crops in Minnesota. HortSci., 26: 507‒512.
Google Scholar

Medina, J., Bargues, M., Terol, J., Perez-Alonso, M., Salinas, J. (1999). The Arabidopsis CBF gene family is composed of three genes encoding AP2 domain-containing proteins whose expression is regulated by low temperature but not by abscisic acid or dehydration. Plant Physiol., 119: 463‒469.
Google Scholar

Medina, J., Catalá, R., Salinas, J. (2011). The CBFs: Three Arabidopsis transcription factors to cold acclimate. Plant Science, 180: 3‒11.
Google Scholar

Orvar Bjorn, L., Sangwan, V., Omann, F., Dhirdsa, R. S. (2000). Early steps in cold sensing by plant cells: the role of actin, cytosceleton and membrane fluidity. The Plant Journal, 23 (6): 785‒794.
Google Scholar

Quamme, H.A. (1990). Cold hardiness of apple rootstocks. Com.Fruit Tree, 23: 11‒16.
Google Scholar

Takata, N., Kasuga, J., Takezawa, D., Arakawa, K., Fujikawa, S. (2007). Gene expression associated with increased supercooling capability in xylem parenhyma cells of larch (Larix kaempferi). Journal of Experimental Botany, 58 (13). 3731‒3742.
Google Scholar

Thomashow, M. F. (1998). Role of Cold-Responsive genes in plant freezing tolerance. Plant Physiol., 118: 1‒7. DOI.​org/​10.​1104/​pp.​118.​1.​1.
Google Scholar

Velasco, R., Zharkikh, A., Affourtit, J., Dhingra, A., Cestaro, A., Kalyanaraman, A., Fontana, P., Bhatnagar, S. K., Troggio, M., Pruss, D., Salvi, S., Pindo, M., Baldi, P., Castelletti, S., Cavaiuolo, M., Coppola, G., Costa, F., Cova, V., Dal Ri, A., Goremykin, V., Komjanc, M., Longhi, S., Magnago, P., Malacarne, G., Malnoy, M., Micheletti, D., Moretto, M., Perazzolli, M., Si-Ammour, A., Vezzulli, S., Zini, E., Eldredge, G., Fitzgerald, L. M., Gutin, N., Lanchbury, J., Macalma, T., Mitchell, J. T., Reid, J., Wardell, B., Kodira, C., Chen, Z., Desany, B., Niazi, F., Palmer, M., Koepke, T., Jiwan, D., Schaeffer, S., Krishnan, V., Wu, C., Chu, V.T., King, S.T., Vick, J., Tao, Q., Mraz, A., Stormo, A., Stormo, K., Bogden, R., Ederle, D., Stella, A., Vecchietti, A., Kater, M.M., Masiero, S., Lasserre, P., Lespinasse, Y., Allan, A.C., Bus, V., Chagné, D., Crowhurst, R.N., Gleave, A.P., Lavezzo, E., Fawcett, J.A., Proost, S., Rouzé, P., Sterck, L., Toppo, S., Lazzari, B., Hellens, R.P., Durel, C.E., Gutin, A., Bumgarner, R.E., Gardiner, S.E., Skolnick, M., Egholm, M., Van de Peer, Y., Salamini, F., Viola, R. (2010). The genome of the domesticated apple (Malus x domestica Borkh.). Nature Genetics, 42 (10): 833‒841.
Google Scholar

Wisniewski, M., Basset, C., Gusta, V. L. (2003). An overview of cold hardiness in woody plants: Seeing the forest through the trees. HortScience, 38 (5): 952‒959.
Google Scholar

Wisniewski, M., Bassett C, Norelli, J., Artlip, T. (2007). Using biotechnology to improve resistance to environmental stress in fruit crops: The importance of understanding physiology. Acta Hort., 738: 145‒156.
Google Scholar

Wiśniewski, M., Bassett, C., Norelli, J., Macarisisn, D., Artlip, T., Gasic, K., Korban, S. (2008). Expressed sequence tag analysis of the response of apple (Malus x domestica ‘Royal Gala’) to low temperature and water deficit. Phisiologia Plantarum, 133: 298‒317.
Google Scholar

Wisniewski, M., Norelli, J., Bassett, C., Artlip, T., Macarisin, D. (2011). Ectopic expression of novel peach (Prunus persica) CBF transcription factor in apple (Malus x domestica) results in short–day induced dormancy and increased cold hardiness. Planta, 233 (5): 971‒983.
Google Scholar

Xu. (2010). The Apple genome: A delicious promise. New York Fruit Quarterly, 18 (4): 11‒14
Google Scholar

Zeng, Ying, Yang, Tao (2002): RNA isolation from highly viscous samples rich in polyphenols and polysaccharides. Plant Molecular Biology Reporter, 20, 417‒417
Google Scholar

Zhao, T., Liang, D., Wang, P., Liu, J., Ma F. (2012). Genome –wide analysis and expression profiling of the DREB transctiption factor gene family in Malus under abiotic stress. Mol. Genet. Genomics, 287: 423‒436.
Google Scholar


Opublikowane
12/09/2020

Cited By / Share

Keller-Przybyłkowicz, S. i Lewandowski, M. (2020) „Ocena zmian profilu ekspresji genów kandydujących w podkładkach jabłoni o odmiennym stopniu tolerancji mrozowej ”, Biuletyn Instytutu Hodowli i Aklimatyzacji Roślin, (291), s. 21–32. doi: 10.37317/biul-2020-PB81.

Autorzy

Sylwia Keller-Przybyłkowicz 
sylwia.keller@inhort.pl
Zakład Hodowli Roślin Ogrodniczych, Instytut Ogrodnictwa, ul. Konstytucji 3 Maja 1/3, 96‒100 Skierniewice Poland
http://orcid.org/0000-0002-3473-9706

Autorzy

Mariusz Lewandowski 

Zakład Hodowli Roślin Ogrodniczych, Instytut Ogrodnictwa, ul. Konstytucji 3 Maja 1/3, 96‒100 Skierniewice Poland
http://orcid.org/0000-0002-4852-5514

Statystyki

Abstract views: 224
PDF downloads: 184 PDF downloads: 46


Licencja

Prawa autorskie (c) 2020 Sylwia Keller-Przybyłkowicz

Creative Commons License

Utwór dostępny jest na licencji Creative Commons Uznanie autorstwa – Na tych samych warunkach 4.0 Miedzynarodowe.

Z chwilą przekazania artykułu, Autorzy udzielają Wydawcy niewyłącznej i nieodpłatnej licencji na korzystanie z artykułu przez czas nieokreślony na terytorium całego świata na następujących polach eksploatacji:

  1. Wytwarzanie i zwielokrotnianie określoną techniką egzemplarzy artykułu, w tym techniką drukarską oraz techniką cyfrową.
  2. Wprowadzanie do obrotu, użyczenie lub najem oryginału albo egzemplarzy artykułu.
  3. Publiczne wykonanie, wystawienie, wyświetlenie, odtworzenie oraz nadawanie i reemitowanie, a także publiczne udostępnianie artykułu w taki sposób, aby każdy mógł mieć do niego dostęp w miejscu i w czasie przez siebie wybranym.
  4. Włączenie artykułu w skład utworu zbiorowego.
  5. Wprowadzanie artykułu w postaci elektronicznej na platformy elektroniczne lub inne wprowadzanie artykułu w postaci elektronicznej do Internetu, lub innej sieci.
  6. Rozpowszechnianie artykułu w postaci elektronicznej w internecie lub innej sieci, w pracy zbiorowej jak również samodzielnie.
  7. Udostępnianie artykułu w wersji elektronicznej w taki sposób, by każdy mógł mieć do niego dostęp w miejscu i czasie przez siebie wybranym, w szczególności za pośrednictwem Internetu.

Autorzy poprzez przesłanie wniosku o publikację:

  1. Wyrażają zgodę na publikację artykułu w czasopiśmie,
  2. Wyrażają zgodę na nadanie publikacji DOI (Digital Object Identifier),
  3. Zobowiązują się do przestrzegania kodeksu etycznego wydawnictwa zgodnego z wytycznymi Komitetu do spraw Etyki Publikacyjnej COPE (ang. Committee on Publication Ethics), (http://ihar.edu.pl/biblioteka_i_wydawnictwa.php),
  4. Wyrażają zgodę na udostępniane artykułu w formie elektronicznej na mocy licencji CC BY-SA 4.0, w otwartym dostępie (open access),
  5. Wyrażają zgodę na wysyłanie metadanych artykułu do komercyjnych i niekomercyjnych baz danych indeksujących czasopisma.

Inne teksty tego samego autora

Podobne artykuły

<< < 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 > >> 

Możesz również Rozpocznij zaawansowane wyszukiwanie podobieństw dla tego artykułu.